[생화학실험.분자유전학실험.유전공학실험] plasmid DNA 정제 (Purification of plasmid DNA)

< plasmid DNA 정제 (Purification of plasmid DNA) > 1. 미리 배양해놓은 cell을 e-tube에 harvest 한다. 2. e-tube에 Solution 1을 일정량 넣고 pipetting을 반복하여 고르게 풀어준다.

(주의 : Solution 1은 효소(RNase A)가 들어있기 때문에 냉장 보관하여야 한다.) * Solution 1 기능 - 50mM glucose : 대장균 세포질의 삼투압을 유지시켜 cell membrane 파괴 방지 - 25mM Tris-Cl : buffer (pH 유지) - 10mM EDTA : 칼슘이나 마그네슘을 제거하여 cell wall 파괴 - RNase A : RNA 제거 3. 2번 e-tube에 일정량의 Solution 2를 넣고 부드럽게 e-tube를 inverting 하며 섞어준다. (주의 : 너무 세게 inverting하지 않도록 주의한다.) *..........