Real-Time PCR을 수행했다. SYBR Green I이 들어있는 Real-Time PCR Premix를 사용했다.
얻은 결과는 위와 같다. 그런데, Template를 넣지 않은 negative control(No Template Control, NTC) 반응에서 Real-Time PCR 산물의 증폭 곡선이 확인 되었다.
어찌된 일일까? 예상했던 결과는 원하는 target 산물만 증폭되었을 거라고 생각했는데 Real-Time PCR 과정에서 무슨 일이 일어난 것일까?
만약, NTC 반응에 Template contamination(오염)이 되어 target 산물이 증폭되었다면, 위에서 얻은 Real-Time PCR 결과는 신뢰할 수 없다. 단순히 결과만 놓고 생각한다면, 충분히 오염 또는 실험자의 부주의에 의한 오류로만 생각할 수도 있다.
그러나, 위..........
원문 링크 : Melting Curve Analysis -1